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福安特抗小鼠移植性肿瘤的实验研究Ⅲ

来源： [ 2006-9-7 13:28:45 ] 作者：编辑：

【摘要】目的 评价福安特注射液对小鼠S180和3LL瘤株的抗肿瘤活性作用，为临床应用提供依据。方法采用荷瘤小鼠作为移植性肿瘤实验动物模型。同性别，体重17～19g，接种肿瘤后随机分组，每组10只。实验设正常对照组，环磷酰胺阳性对照组，福安特高、中、低剂量组，共5组。每天定时给药，正常对照组每天注射等量生理盐水，连续14天。结果福安特可影响S180和3LL肿瘤的生长速度，瘤体积缩小，瘤体重量减轻，抑瘤效果较明显，抑瘤率分别达41.57%和4239%。结论福安特对S180和3LL荷瘤小鼠具有一定抗肿瘤活性作用。

    【关键词】 福安特动物模型抗肿瘤活性

    Experimental study for Fu-an-te on transplantable carcinomas in mouse Ⅲ


    【Abstract】 Objective To evaluate the anti-tumour-activity effect of Fu-an-te injection for S180 and 3LL，provide a evidence for clinical application.Methods Use tumour load mouse as transplantable carcinomas animal model. Same sex，weight 17～19g，randomly divide group after inoculate tumour cell，10 mouse in every group，the experiment including 5 groups： normal control group，positive group and 3 doses of the new drug were chosen for each pharmacodynamic research then. Give the drug on time for every group，and normal control group with equate water，series for 14 days in the formula pharmcodynamic tests.Results Fu-an-te can affect tumour growth speed for S180 and 3LL. The volume of tumour was reducing，weight was light and growth inhibition effect on transplantable tumour was in evidence. The inhibition rate for tumour can reach at 41.57% and 42.39%. Conclusion Fu-an-te have a good anti-tumour-activity effect for S180 and 3LL.

    【Key words】   Fu-an-te animal model anti-tumor-activity

    流行病学调查表明，近年来无论在世界范围还是在中国国内，恶性肿瘤的发病率和死亡率均呈上升趋势。恶性肿瘤已成为常见病和多发病。由于恶性肿瘤在临床表现的多样性，而临床治疗上，常规应用的化疗药物又普遍存在毒副反应大、疗效不稳定、复发率高等问题。因此，寻找一种低毒、疗效稳定、使用方便且具有广谱抗肿瘤活性的药物成为抗肿瘤药物研究和临床中亟待解决的问题。目前，肿瘤预防研究的主要研究目标之一是寻找高效、低毒的药物。作为福安特注射液主要成分的熊果酸，1990年就被日本列为最有希望的肿瘤预防药物之一［1］。熊果酸（ursolic acid，UA）又名乌索酸、乌苏酸，属三萜类化合物，抗肿瘤活性是熊果酸最主要的药理作用，同时也具有其它广泛的生物活性，包括抗癌、对肝损伤的保护作用、抗菌消炎和抗病毒等作用［2］。近年来研究表明熊果酸可以对抗致癌物如B（α）P、黄曲霉素B1诱发的基因突变，抑制TPA对二甲基苯并蒽（DMBA）诱导的小鼠皮肤癌的促癌作用，因而认为熊果酸不仅具有抗突变、抗促癌物作用，对多种恶性肿瘤细胞也有抑制生长的作用。此外，熊果酸还可诱导F9畸胎瘤细胞成为内胚层细胞及抗血管生成。因此，熊果酸的抗肿瘤活性越来越引起人们的注意［3］。Lee 等用熊果酸进行了6种癌细胞系的细胞毒试验，结果表明熊果酸对P-388、L-1210白血病细胞和A-549人肺腺癌细胞有显著的细胞毒作用，其ED50均小于4mg/L［4］。黄镜等对芦笋有效成分熊果酸诱导细胞凋亡的实验研究结果表明熊果酸可诱导细胞凋亡，能抑制致癌物与促癌物的致癌作用，表明熊果酸有抗瘤作用，其作用机制是抗增殖和诱导肿瘤细胞凋亡［5］。

    目前有关熊果酸的研究主要集中于体外细胞学试验和作用机制研究。有关活体动物的体内试验则未见报道。本研究所用福安特注射液的主要成分为熊果酸，通过使用小鼠动物模型对移植性3LL和S180所进行的活体动物抗肿瘤活性试验，初步评价该药物对这两种小鼠移植性肿瘤的抗肿瘤活性作用，为本药的药效学评价和进一步临床应用提供基础数据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 C57BL/6J、KM小鼠由中国医学科学院实验动物研究所提供，体重：18～22g，雌性，合格证号：SCXK11-00-0006。

    1.1.2 药物 (1)受试药：福安特，白色针粉剂，规格：6mg/瓶。熊果酸含量6mg/瓶，熊果酸纯度97.3%。由湖北省武汉利元亨药物技术有限公司提供，批号：030806。试验前用生理盐水溶解。(2)阳性对照药：环磷酰胺购于中国医学科学院肿瘤医院，由上海华联制药公司生产，沪卫药准字（1995）第012034号，生产批号：030309，生产日期：030313，有效期至2005年3月。

    1.1.3 瘤株来源 3LL（小鼠Lewis肺癌）、S180（肉瘤180）购于中国医学科学院药物研究所。

    1.2 分组和剂量

    1.2.1 动物分组挑选成功接种的小鼠，随机分为5组即：空白对照组、阳性对照组（环磷酰胺）、福安特高剂量组、福安特中剂量组、福安特低剂量组，每组10只小鼠。

    1.2.2 给药剂量阳性对照组，于肿瘤细胞接种后次日腹腔注射环磷酰胺（30mg/kg）。福安特高、中、低剂量组给药剂量分别为半数致死量LD50（22.68mg/kg）的1/5、1/10、1/20，即4.536mg/kg、2.268mg/kg、1.134mg/kg于肿瘤细胞接种后次日腹腔注射，每日1次。空白对照组同时给予相同容量的蒸馏水至实验结束。空白对照组、阳性对照组、受试药组（低、中、高剂量组），每组动物数为10只。

    1.3 方法

    1.3.1 动物肿瘤模型的建立 (1)S180动物模型的建立：肿瘤细胞自液氮内取出复苏后接种于KM小鼠腋窝皮下，待瘤体长至1～1.5cm时，处死小鼠。选择生长良好的瘤组织制备成单细胞悬液，活瘤细胞计数后，每只小鼠腋窝皮下接种1×105瘤细胞悬液，动物随机分组，每组10只。(2)3LL动物模型的建立：肿瘤细胞自液氮内取出复苏后接种于C57BL/6J小鼠腋窝皮下，待瘤体长至1～1.5cm时，处死小鼠。选择生长良好的瘤组织制备成单细胞悬液，活瘤细胞计数后，每只小鼠腋窝皮下接种1×106瘤细胞悬液，动物随机分组，每组10只。

    1.3.2 给药方法、剂量、时间及观察指标 (1)选择腹腔给药途径，给药剂量随体重变化而变化。(2)给药时间：每天定时给药，每日1次，连续给药14d。试验前、后分别称量体重，并计算体重增长率（%）。(3)日常观察：包括精神状态、饮食、排泄、毛色、活动等方面。(4)用卡尺定期测量瘤体的长和宽，并计算瘤体缩小率（%）。

    1.3.3 肿瘤抑瘤率终止治疗后，各组动物全部同时处死，取出瘤体称瘤重。按下式计算瘤重抑制率：肿瘤抑制率%=（1-治疗组平均瘤重/对照组平均瘤重）×100%。

    1.4 数据处理每批实验数据均使用SPSS10.0统计软件进行处理，包括描述性统计和方差分析，计算方法参见文献［6］。

    2 结果

    在每批实验过程中，受试动物的精神状况、食欲、饮水、被毛、活动及排泄等外观表现均未见异常。

    2.1 福安特对3LL荷瘤小鼠肿瘤生长速度、小鼠体重的影响以及实验结果与正常对照组相比经统计学处理试验组间可见一定差异，结果见表1～3。

                  表1 福安特对3LL荷瘤小鼠肿瘤生长速度的影响

    注：3LL肿瘤重量(g)

    从表1可以看出，福安特中剂量组对3LL荷瘤动物肿瘤生长速度的影响略大于高、低剂量组，但均低于阳性对照组。每批试验结果重复性较好。

                  表2 福安特对3LL荷瘤小鼠体重增长的影响

    注：3LL体重(g)

    从表2可以看出，福安特各剂量组对3LL荷瘤动物体重增长影响不大，阳性对照组对动物体重增长速度明显低于受试药组。

                  表3 福安特对3LL荷瘤小鼠肿瘤重量的影响

    注：The mean difference is significant at the 0.05 level. aDunnett t-tests treat one group as a control，and compare all other groups against it.Dependent Variable：3LL肿瘤重量(g)

    从表3可以看出，福安特各剂量组对3LL荷瘤动物肿瘤重量影响较大，与空白对照组相比各受试药组及阳性对照组均出现显著性差异P＜0.05。

    2.2 福安特对S180荷瘤小鼠肿瘤生长速度、瘤体重量及体重等的实验结果与正常对照组相比较经统计学处理实验组间出现显著性差异，结果见表4～6。

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