表1 海马bax阳性细胞平均数目(N)和光密度(D)的比较 (x±s)
注：*P＜0.01 compared with NC group and PTZ group，
** P＜0.05 compared with NC group
表2 海马bcl-2阳性细胞平均数目(N)和光密度(D)的比较 (x±s)
注：*P＜0.01 compared with NC group and PTZ group，
** P＜0.05 compared with NC group
3 讨论
细胞凋亡是能量依赖的细胞内死亡程序活化而致的“程序性细胞死亡”，是细胞的一种生理性、主动性的“自觉自杀行为”。神经系统发育过程中凋亡现象普遍存在。在许多中枢神经系统疾病中，神经细胞的死亡也涉及凋亡机制，癫痫是神经系统的常见病，癫痫长期发作可以造成患者的智力和认知功能发生改变，其中主要是与癫痫发作导致神经元损害有关，因此临床发现癫痫病人大多有海马硬化存在。大量动物实验发现癫痫发作过程中造成的海马神经细胞的损害可诱导典型的凋亡现象发生［2］。细胞凋亡与许多基因表达密切相关，有促进凋亡的基因，如Bax；也有某些基因的表达可使细胞抗凋亡能力增强如Bcl-2。Bcl-2可以与Bax结合形成Bcl-2/Bax异二聚体，阻止Bax插入线粒体外膜，保护线粒体电势梯度，调节细胞内Ca2+的自稳状态和氧化还原状态等多方面来抑制凋亡［3］。本研究发现，癫痫发作后Bcl-2、Bax蛋白表达阳性率明显升高，而正常对照组仅有少量表达，说明癫痫发作可以激发内源性的抗凋亡机制，但是这种保护机制是有限的，长期癫痫发作必将导致大量细胞的死亡，海马硬化。因此探讨有效的抗凋亡机制在保护癫痫发作后的神经元的死亡，提高患者的生活质量，减轻家庭和社会的负担具有重要的意义。
褪黑素是松果体腺分泌的一种激素，人体的褪黑素主要来源于松果体腺的分泌。此外，视网膜及胃肠道等组织也可合成褪黑素。其生理作用是调节季节性节律和昼夜节律，此外它还具有镇静、催眠、镇痛、抗抑郁、抗惊厥、调节免疫反应、延缓衰老及调节生殖系统的生长发育等多种生理功能。目前，褪黑素对肿瘤、老年性疾病、心血管疾病和癫痫等的作用机理研究，已成为科学家们关注的热点。Reiter等［4］研究发现褪黑素可以明显抑制海仁酸所诱导的癫痫发作；我们的实验研究也发现褪黑素可以明显减轻戊四氮所诱导的癫痫发作，使发作的程度减轻，发作的时间缩短。因此褪黑素可以作为一个潜在的抗癫痫药物。并且我们的研究还发现，它还可以诱导Bcl-2蛋白的表达，抑制Bax蛋白的表达，使Bcl-2/Bax的比值升高，稳定线粒体膜，从而发挥抗细胞凋亡的作用。其上调Bcl-2和下调Bax表达的具体机制不是很清楚，可能与以下因素有关：(1)MT具有高效的自由基清除能力，可清除体内多种自由基，从而抑制自由基所诱导的Bax的上调表达［5］。(2)褪黑素能够抑制MDA的产生，减轻氧化损伤所诱导的Bax的上调表达。(3)抑制NF-κB的表达，从而抑制Bax的上调表达［6］。(4)褪黑素可以使细胞内的GABA的浓度升高，兴奋性氨基酸(谷氨酸)的浓度降低，使Bcl-2的表达升高。(5)阻止Ca2+通道，抑制线粒体内Ca2+超载所诱导的Bax的表达增加所触发的细胞凋亡。
总之，褪黑素作为一个潜在的抗癫痫药物，不仅能够控制痫性发作，它还可以通过多种途径抑制细胞的凋亡，减轻癫痫发作所诱导的细胞损伤。
【参考文献】
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