作者：王玉玺，王惠国，王俊志，王雅贤，王 丽

【摘要】  目的  研究祛毒胶囊治疗系统性红斑狼疮（SLE）样小鼠的免疫学机制。方法  用LPS诱导昆明纯种小鼠制备了SLE样模型。灌胃15日后分别用ELISA法检测血清抗ds-DNA抗体、白介素10（IL-10）水平，用考马斯亮兰法检测小鼠24h尿蛋白的含量，镜下观察肝、肾病理改变情况。结果  祛毒胶囊具有降低ds-DNA抗体，抑制IL-10表达，减少小鼠的尿白蛋白，改善脏器组织的病理性改变的功能。结论  祛毒胶囊对SLE小鼠有一定疗效。
   
    【关键词】  祛毒胶囊；系统性红斑狼疮；白介素-10；ds-DNA
   
    系统性红斑狼疮（SLE）是一种典型的系统性自身免疫性疾病，其特征是多克隆B细胞异常活化、多种自身抗体的产生和T淋巴细胞调节异常［1］。研究发现，SLE发病中存在着细胞因子失常，网络性细胞因子失衡在SLE发病中起重要作用［2］。在临床实践中，根据凉血解毒、活血化瘀法组方的祛毒胶囊是笔者多年来治疗SLE行之有效的专用复方。本研究旨在通过对狼疮小鼠血清中的细胞因子白介素10（IL-10）及抗 ds-DNA抗体的测定来探讨祛毒胶囊治疗SLE的免疫学机制。
   
    1  材料与方法
   
    1.1  动物模型及分组  纯系昆明小鼠，20～22g，8～10周，雌雄各半，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。参照WHO免疫研究教学中心（WHO IMMUNOLOGY RESEARCH AND TRAINING CENTRE）Tito Cavallo［3］、Francisco［4，5］的报道方法造模，于造模前2h按分组灌胃给予相应药物。将75只小鼠随机分为5组，设A组为正常对照组，B组为模型对照组，给予等量的生理盐水灌胃；C组用祛毒胶囊水溶液治疗，给予生物0.5ml/（20g·d），浓度为4g/ml；D组用醋酸泼尼松治疗，0.5m/（20g·d），溶液浓度为0.312g/ml；E组用祛毒胶囊、醋酸泼尼松联合治疗，醋酸泼尼松给予溶液0.25ml/（20g·d），中药0.25ml/（20g·d）。
   
    1.2  药品与试剂  新药祛毒胶囊由黑龙江中医药大学提供。醋酸泼尼松，规格5mg×100片/瓶，上海信谊药业有限公司出品，批号：030401。LPS购于北京拜尔迪生物公司，目录号为L-2880。IL-10，anti ds-DNA试剂盒购于TPI Inc.17037 34thAve，Suite G Lynnwood，Washington 98003 U.S.A.考马斯亮蓝G250 (Fluka进口分装）。
   
    1.3  仪器  酶标仪，恒温箱，显微镜。
   
    1.4  血清IL-10、抗ds-DNA抗体含量的测定  于第15天采用摘眼球取血的方法制备血清标本，按试剂盒说明操作检测各项指标。
   
    1.5  考马斯亮蓝法检测蛋白尿  用牛血清白蛋白制作标准曲线，将测得的OD值带入标准曲线方程，得蛋白尿浓度。将蛋白尿浓度与24h尿量相乘，得到24h尿蛋白总量。
   
    1.6  SLE鼠肝肾病理检查  摘眼球处死小鼠后，取出肝、肾做石蜡切片观察病理改变。
   
    1.7  统计学方法  采用SPSS 10.0统计软件包进行统计学处理，所有资料均用(x±s)表示，采用多样本均数比较的方差分析法。
   
    2  结果
   
    2.1  祛毒胶囊治疗SLE样小鼠IL-10、ds-DNA、尿白蛋白水样的影响  见表1。模型组IL-10、抗ds-DNA抗体、2h尿白蛋白水平明显高于其他各组，差异有显著性（P＜0.05）。各药物治疗组对IL-10分泌的影响与空白组比较，差异无显著性（P＞0.05）。对ds-DNA抗体的影响，各药物治疗组间差异无显著性（P＞0.05）。对24h尿白蛋白水平的影响，中药组和联合用药组差异无显著性（P＞0.05）。

表1  祛毒胶囊治疗SLE样小鼠IL-10、ds-DNA、尿白蛋白水平的影响  (x±s)

注：*P＜0.05，**P＞0.05
   
    2.2  肝肾病毒改变  模型组动物肾小球毛细血管丛增生，充血，内皮细胞肿胀，集合管腔内见蛋白管型，近曲小管，基膜增厚。肝细胞严重脓肿，可见小灶性坏死，小叶中央静脉扩张淤血，汇管区内见有大量淋巴细胞浸润，并有少量胆色素颗粒。说明所造动物模型符合SLE病理改变特点（另外报道）。