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2.4 溶甲法 35例直接镜检阳性标本均检出真菌成分。33例皮肤癣感染的病甲：菌丝多较细，见图4；2例分离酵母菌的病甲，1例见假菌丝和顶端厚壁孢子，提示为白色念珠菌。17例培养阴性的病甲：菌丝多较细，分隔、分支，关节孢子，提示多为皮肤癣菌。
2.5 4种方法检出结果 见表1。
表1 61例疑甲真菌病4种方法检查结果 例(%) 
病检法与直接镜检相比，χ2 =7.69，P<0.05，病检法检出率高于直接镜检法；病检法与培养法相比，χ2 =4.9，P<0.05，病检法检出率高于培养法；溶甲法与直接镜检相比，χ2 =16.06，P<0.05，溶甲法检出率高于直接镜检法；溶甲法与培养法相比，χ2=10.32，P<0.05，溶甲法检出率高于培养法；溶甲法与病检法相比，χ2=4.0，P<0.05，溶甲法检出率高于病检法。
3 讨论
甲真菌病是为数不多的可治疗的甲病之一，因而其正确诊断十分重要。直接镜检检出率较低，本研究为5738%，但快速、方便，可直接明确有无真菌感染。培养法检出率62.30%，造成培养阳性率低的原因可能是：(1)取材不当，如标本中无活的菌丝存在，取甲屑培养则无菌生长。(2)培养基选择，如放线菌酮在一定程度上抑制皮肤癣菌以外的真菌（酵母菌）生长。培养法要求观察4周，门诊一般也要10天后出报告，耗时虽较长，但可鉴定菌种，进而行药敏试验，对药物的选择有一定指导意义，如克柔念珠菌对氟康唑天然耐药。 病检法检出率75.41%，高于直接镜检和培养法，能观察到真菌在甲中寄生的状况，可对病原菌做初步分类，并可对银屑病等病甲明确诊断，但由于病理切片只能观察甲的断面，相对容易漏诊和误诊，甲切片对切片刀磨损大，制片过程需1周，对实验人员实验组织病理学要求较高，使该法推广受限。
溶甲法检出率86.89%，高于直接镜检、培养法和病检法。溶甲法通过较高浓度KOH和加热溶解角质，在短时间内将寄生于甲内的真菌充分暴露，洗去甲溶解物质，可使整个病甲而非某一断面的真菌沉淀涂片观察，从而使甲真菌病的检出率大为提高。Liu等于1993年开展了20%KOH处理甲屑后PAS染色诊断甲真菌病［4］，国内甄莉等有类似报道［5］。我们考虑到PAS染色过程需反复冲洗，相对复杂，同时增加了样本损失的可能性，故改用Parker墨水染色。该法能清晰地观察到各种形态的菌丝和孢子，真实地反映了真菌在组织内的寄生形态，从而较全面地辨析病原菌类别；菌丝量多少与甲受累轻重程度相一致，如菌丝少而散在者甲变色变形程度轻，大量菌丝扭曲成团者甲变色变形明显。除典型假菌丝和顶端厚壁孢子提示白色念珠菌感染，曲霉头、帚状枝结构可提示曲霉和青霉感染外，溶甲法不能进行真菌种类的鉴定。
溶甲法在甲真菌病诊断方法中具有准确、快速、简便、价廉及可保存等特点。门诊病例可无需固定步骤，制作湿片即可镜下观察出报告，完成1份标本在1h左右，在日益繁忙的皮肤性病科门诊具有推广价值。
通过对甲真菌病4种诊断方法的对照研究表明：20%KOH溶甲法是一种检出率高、可行性强的甲真菌病诊断方法。结果提示组织病理学检查和20%KOH溶甲法可弥补甲真菌病诊断真菌直接镜检和真菌培养法的不足，显著提高诊断阳性率和准确率。
（本文图片见封三） 
【参考文献】
1 Roberts DT.Prevalence of dermatophyte onychomycosis in the united Kingdom： results of an omnibus survey. Br J Dermatol， 1992，126(S39)：23-27.
2 Daniel CR.The diagnosis of nail fungal infection. Arch Dermatol，1991，127：1566-1567.
3 牛云彤，李少平.甲真菌病的诊断.中国麻风皮肤病杂志， 2004，20(1)： 57-58.
4 Liu HN.KOHCPA： a new method for diagnosing tinea unguium. Dermato， 1993，187：166-168.
5 甄莉， 刘亚军.不同浓度NaOH溶解疑甲癣病甲检测真菌41例. 山西医科大学学报， 2000，31(1)：81. |
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