3  讨论

    3.1  还原型谷胱甘肽对缺氧／复氧心肌细胞损伤的影响  大量研究表明，缺血再灌注期间大量氧自由基的产生可造成细胞损伤。氧自由基导致细胞损伤主要环节为作用于细胞外基质，使胶原和透明质酸崩解，使膜磷脂结构的多聚不饱和脂肪酸过氧化而直接损伤细胞膜；肌浆网和线粒体崩溃，心肌细胞在缺氧缺糖条件下，ATP产生减少，代谢障碍，代谢产物堆积，使膜稳定性降低，溶酶体释放，导致生物损伤、变性，使LDH释放在培养基中，同时再给氧时氧自由基增加，细胞膜受攻击，细胞膜损伤。细胞内LDH进一步增加，故LDH释放量是观测缺血再灌注损伤重要指标。脂质过氧化产物丙二醛(MDA)，其含量变化可作为评定自由基生成及对膜脂质双层结构破坏的指标。本实验从培养的未成熟鼠心肌细胞入手，排除了在体和离体灌注模型中神经、体液因素及其他混杂细胞因素的影响，直接利用还原型谷胱甘肽处理培养的未成熟鼠心肌细胞，结果发现还原型谷胱甘肽各浓度组均可降低缺氧／复氧损伤造成的心肌细胞死亡率，减少细胞内LDH漏出，减少细胞内MDA生成，且存在量效关系，表明还原型谷胱甘肽对未成熟鼠心肌细胞有保护作用。

    3.2  还原型谷胱甘肽对缺氧／复氧心肌细胞损伤的保护机制  还原型谷胱甘肽(GSH)对清除自由基有重要作用，它是机体内一种重要的抗氧化剂，它能有效清除氧化产生的自由基，维持细胞内环境的稳定，并在使暴露于氧化环境的组织免受自由基损害方面起重要作用［4］。GSH在谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的作用下对有机过氧化物(ROOH)和无机过氧化物(H2O2)起重要清除作用，其还可以起维生素C还原剂的作用，使维生素C成为还原型而不断清除超氧自由基。近期有研究表明［5］，GSH可维持线粒体内膜巯基基团的还原状态。当GSH含量下降，内源性自由基攻击线粒体蛋白巯基的可能性增大，一方面使酶活性降低，影响线粒体氧化代谢的3个关键酶及电子传递链中酶的活性，NADH减少，ATP产生减少。另一方面，导致膜蛋白巯基氧化交联，构型改变，线粒体膜渗透性转运通道打开，钙释放增加，胞浆钙上升，激活细胞膜PLA2和中性蛋白水解酶(CANP)，导致细胞膜的损伤或死亡。本实验表明补充外源性GSH，对保护细胞膜的功能可能具有重要意义，对临床各种疾患造成的心肌细胞缺氧／复氧损伤有保护作用。

    【参考文献】

    1 Shigematsu  S，Arita M.Anoxia depresses sodium-calcium exchange currents in guinea-pig ventricular  myocytes.Mol  Cell  Cardiol，1999，31(4):895-906.
    2  Schafer C，Ladilov YV，Schafer M，et al.Inhibition of NHE protects  reoxgenated  cardiomyocytes independently of anoxic Ca2+ overload and acidosis.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2000，33(2):343-357.
    3 Salie R，Harper I，Cillie C，et al. Melatonin protects against  ischaemic-reperfusion  myocardial damage.J Mol Cell Cardiol，2001，33(2):343-357.
    4 Changce  B，Sies  H，Boveris  A.Hydroperoxide  metabolism  in  mammalian  organs.  Physiol  Rev ，1997，59(3):527-605.
    5  Alession HM. Lipid peroxidaton and scavengerenzymes during exrcise:adoptive 　response to training.Physiol，1998，64:133-1336.