1.2.3 样品检测
将上述各种菌丝体研碎，分别用80％酒精热提2次，蒸去酒精，浓缩液滴加5%盐酸使成酸性，过滤［4］，即为用于生物碱定性检测的提取液。
取各样品的菌丝体提取液和培养液少量，分别滴加1~2滴以下3种试剂：（1）碘化铋钾试剂（Dragendorff’s reagent），若产生黄至桔红色沉淀则为阳性反应；（2）碘-碘化钾试剂，若产生棕色或褐色沉淀为正反应；（3）碘化汞钾试剂（Mayer’s reagent），生成类白色沉淀者为正反应［5］。
选取上述检测呈阳性的真菌进一步进行薄层层析（TLC）分析。将干燥的平贝母药材粉碎，过60目筛作为对照品，与待测菌丝体都于60 ℃烘箱中烘至恒重，按文献6方法制备样品［6］。将对照品和样品提取液都点样于硅胶G薄板，采用环己烷-醋酸乙酯-二乙胺（6∶4∶1）作为展开剂，改良碘化铋钾试剂为显色剂，进行TLC检测。
2 实验结果与讨论
从平贝母幼苗中共分离出9种内生真菌，分别以Fu1~Fu9表示之。培养液的3种定性反应除少数为不确定结果外，均为阴性反应，说明其中不含生物碱或生物碱浓度很低。菌丝体提取液的定性反应结果如表1所示。表1 各种内生真菌菌丝体提取液的定性反应结果（略）
从表1中可以看出：Fu7菌株的菌丝体提取液在上述3种定性反应中都呈明确阳性，说明它具有产生生物碱的能力，因此将其进行进一步的TLC检测，结果药材对照样品有3个斑点出现，说明其中至少含有3种生物碱；而所测Fu7样品出现2个斑点，且它们的Rf值与药材提取物中的两个点基本相同。因此，样品中应该含有与平贝母中相同或相似的生物碱，对该菌我们还将进行进一步的研究。
［参考文献］
1 国家环境保护局，中国科学院植物研究所.中国珍稀濒危植物名录.北京：科学出版社，1987，197-200.
2 陈业高.植物化学成分.北京：化学工业出版社，2004，275.
3 刘芸，殷红，彭辉，等.植物内生真菌—潜在的天然药物新来源.中华现代中西医杂志，2005，3（5）：404-405.
4 上海药物研究所.中草药有效成分的提取和分离.上海：上海人民出版社，1972，179-180.
5 郭良栋.内生真菌研究进展.菌物系统，2001，20（1）：148-152.
6 赵得永.4种川贝母的总皂甙、总生物碱及西贝素的含量测定.中国中药杂志，1994，19（2）：71-73.
